用於實驗室診斷中樞神經係統感染的標本GydF4y2Ba




用於實驗室診斷中樞神經係統感染的標本GydF4y2Ba
用於實驗室診斷中樞神經係統感染的標本GydF4y2Ba

用於實驗室診斷中樞神經係統感染的標本GydF4y2Ba

中樞神經係統感染包括腦膜炎GydF4y2Ba

  • 懷疑中樞神經係統感染的患者診斷的第一步是腰椎穿刺(脊柱水龍頭)。GydF4y2Ba

樣品:GydF4y2Ba腦脊液(CSF)GydF4y2Ba

CSF的收集和運輸:GydF4y2Ba

  • 無菌CSF被收集。GydF4y2Ba
  • 在L3,L4或L5之間的腰椎區域,將針頭插入蛛網膜下腔空間(腰椎穿刺)。GydF4y2Ba
  • 在無菌收集管中,應收集三個或四個CSF的管。它不應包含添加劑。GydF4y2Ba
  • 管1用於:GydF4y2Ba
    • 化學研究GydF4y2Ba
    • 葡萄糖和蛋白質計數GydF4y2Ba
    • 免疫學研究GydF4y2Ba
  • 試管2用於培養。GydF4y2Ba
  • 試管3和4用於細胞計數和差異計數。GydF4y2Ba
  • 要收集的體積的數量取決於患者中可用的體積,成年人和新生兒之間可能有所不同。GydF4y2Ba
  • 當針頭首先穿刺蛛網膜下腔空間時,觀察到CSF的開口壓力。GydF4y2Ba
  • 在高開口壓力下,應緩慢收集CSF,以防止收集大量的流體。GydF4y2Ba
  • 為了檢測分枝杆菌和真菌,建議至少5至10毫升。GydF4y2Ba
  • 離心和隨後的文化進行了。GydF4y2Ba
  • 如果樣本不足,可以看到錯誤的結果。GydF4y2Ba
  • CSF應盡快發送到實驗室。GydF4y2Ba
  • 在一個小時或更長時間後延遲的情況下,諸如GydF4y2Ba鏈球菌GydF4y2Ba肺炎GydF4y2Ba,可能無法檢測到。GydF4y2Ba
  • 不應將CSF冷藏用於微生物學研究。GydF4y2Ba
  • 在延遲的情況下,應將其留在室溫下或在35°C下孵育。GydF4y2Ba
  • 對於病毒研究,可以在收集後23小時或在-70°C冷凍後冷藏CSF。GydF4y2Ba
  • 對於血液學研究,可以將CSF標本冷藏,GydF4y2Ba
  • 對於化學和血清學,可以冷凍CSF(-20°C)。GydF4y2Ba

CSF的初始處理:GydF4y2Ba

  • 所有用於細菌,真菌或寄生研究的CSF標本都應離心。GydF4y2Ba
  • 應使用大於1 mL的體積。GydF4y2Ba
  • 離心應以1500×GydF4y2BaGGydF4y2Ba15分鍾。GydF4y2Ba
  • 應仔細處理可疑的隱孢子球或分枝杆菌標本。GydF4y2Ba
  • 當CSF少於1毫升可用時,應進行革蘭氏汙漬,並直接將其鍍到血液和巧克力瓊脂板上。GydF4y2Ba
  • 將上清液移至無菌管,剩下約0.5 mL的流體。GydF4y2Ba
  • 為了進行視覺檢查和培養,剩餘的流體用於懸浮沉積物。GydF4y2Ba
  • 可以使用上清液:GydF4y2Ba
  • 測試抗原的存在GydF4y2Ba
  • 快速診斷測試(垂直流免疫色譜法)GydF4y2Ba
  • 為了GydF4y2Ba腦膜炎GydF4y2Ba
  • 用於化學評估(例如蛋白質,葡萄糖,乳酸,C反應蛋白)。GydF4y2Ba

實驗室診斷:GydF4y2Ba

  • 醫師與微生物實驗室之間的交流對於適當診斷和治療患者至關重要。GydF4y2Ba
  • 在幾乎所有病例中,可以排除患有正常液體參數的患者的急性細菌性腦膜炎的診斷。GydF4y2Ba
  • 類似的標準已被用來排除CSF標本上的結核病和梅毒血清學的塗片和培養物的性能。GydF4y2Ba

1. CSF中病因學的視覺檢測:GydF4y2Ba

  • 檢查了CSF沉積物是否存在細胞和生物。GydF4y2Ba

i)染色的沉積物:GydF4y2Ba

  • 革蘭氏染色應在所有CSF沉積物上進行。GydF4y2Ba
  • 使用受汙染的幻燈片可能會產生假陽性塗片。GydF4y2Ba
  • 沉積物應徹底混合,並將堆滴放在幻燈片中。GydF4y2Ba
  • 幻燈片應無菌或酒精清洗。GydF4y2Ba
  • 沉積物絕不應散布在幻燈片表麵上。GydF4y2Ba
  • 這是因為很難找到少量的微生物。GydF4y2Ba
  • 允許沉積物滴幹。GydF4y2Ba
  • 然後將其加熱或甲醇固定。GydF4y2Ba
  • 然後,它被克或雜氨橙色染色。GydF4y2Ba
  • 可以通過Acridine Orange熒光色染色來對高功率放大倍數(400×)的載玻片進行更快的檢查。GydF4y2Ba
  • 熒光細菌可以輕鬆可視化。GydF4y2Ba
  • 可以使用革蘭氏汙漬(直接在尖氨橙橙上,可以做到生物體的存在和形態的確認。GydF4y2Ba
  • 使用細胞紡絲離心機是製備染色幻燈片的絕佳替代方法。GydF4y2Ba
  • 它濃縮了細胞材料,細菌細胞最多可達1000倍。GydF4y2Ba
  • 進行離心進行,然後將CSF濃縮到微觀載玻片的圓形區域。GydF4y2Ba
  • 然後將其固定,染色和檢查。GydF4y2Ba
  • 應該為存在或不存在細菌,炎性細胞和紅細胞的情況進行報告。GydF4y2Ba

ii)濕製準備:GydF4y2Ba

  • 通過這種方法最好觀察到變形蟲。GydF4y2Ba
  • 在相對比顯微鏡下,可以將沉積物作為濕製劑檢查。GydF4y2Ba
  • 光學顯微鏡可以通過稍微關閉冷凝器來用作替代方案。GydF4y2Ba
  • 必須將變形蟲與偶爾出現在CSF中的運動巨噬細胞區分開。GydF4y2Ba
  • 三色染色可用於分化與體細胞的變形蟲。GydF4y2Ba
  • 在草坪上GydF4y2Ba克雷伯氏菌肺炎GydF4y2Ba或者GydF4y2Ba大腸杆菌GydF4y2Ba,可以培養致病性變形蟲。草地。GydF4y2Ba

iii)印度墨水染色:GydF4y2Ba

  • 加密型新羊角GydF4y2Ba由大型多糖膠囊組成,可以通過印度墨水染色來形象。GydF4y2Ba
  • 對於囊抗原,乳膠凝集測試更靈敏,非常具體。GydF4y2Ba
  • 建議比印度墨水染色進行抗原測試。GydF4y2Ba
  • 在艾滋病患者的情況下,培養是必不可少的GydF4y2Ba新羊角GydF4y2Ba可能不存在。GydF4y2Ba
  • 一滴CSF的沉積物與印度墨水的三分之一墨水混合在一起,用於印度墨水準備。GydF4y2Ba
  • 通過添加0.05毫升硫鎂,可以保護印度墨水免受汙染。GydF4y2Ba
  • 通過混合CSF和墨水來製作光滑的懸架。GydF4y2Ba
  • 然後將蓋玻片應用於滴頭。GydF4y2Ba
  • 然後在高功率放大倍數(400×)下檢查特征性封裝的酵母細胞。GydF4y2Ba
  • 可以在浸入油下進行檢查。GydF4y2Ba
  • 白細胞不得與酵母混淆。GydF4y2Ba
  • 與母細胞小的封裝芽的存在是診斷性的。GydF4y2Ba

2.直接檢測病因:GydF4y2Ba

抗原檢測GydF4y2Ba:GydF4y2Ba

  • 為了快速檢測CSF中的抗原,可以使用商業試劑和試劑盒。GydF4y2Ba
  • 通過乳膠凝集,可以從CSF進行快速抗原檢測。GydF4y2Ba
  • 抗體塗層的顆粒與特定的抗原結合,從而導致宏觀可見的凝集。GydF4y2Ba
  • 可溶性囊膜多糖,包括B組鏈球菌多糖,非常適合用作橋接抗原。GydF4y2Ba
  • 凝集分析中存在多克隆或單克隆抗體或抗原。GydF4y2Ba
  • 已經開發了不同的商業係統。GydF4y2Ba
  • 可溶性抗原可能會集中在尿液中GydF4y2Ba鏈球菌agalactiaeGydF4y2Ba和GydF4y2Ba流感嗜血杆菌。GydF4y2Ba
  • 對於抗原檢測測試係統的性能,必須遵循製造商的方向GydF4y2Ba
  • 一些係統也可能需要對通常持續5分鍾的樣品進行預處理。GydF4y2Ba
  • 建議使用商業體液抗原檢測試劑盒的實驗室進行預處理,稱為抗原程序快速提取(REAP)。GydF4y2Ba
  • 隻有有限數量的臨床有用情況需要細菌抗原測試(BAT)。GydF4y2Ba
  • 診斷和管理細菌性腦膜炎的實踐指南不建議常規使用BAT。GydF4y2Ba

涉及腦膜炎的細菌:GydF4y2Ba

加密賽車:GydF4y2Ba

  • 為了檢測多糖囊抗原GydF4y2Ba加密賽車,GydF4y2Ba這些試劑可在商業上購買。GydF4y2Ba
  • 當在CSF標本中獲得加密局局的陽性結果時,應進行第二次乳膠凝集試驗,用於類風濕因子。GydF4y2Ba
  • 乳膠凝集測定法(眾多商業製造商)和酶免疫測定均可用於檢測加密球菌抗原。GydF4y2Ba
  • 假陰性反應可以在未稀釋的標本中看到,其中包含大量囊抗原。GydF4y2Ba
  • 假陰性反應是由Prozone現象引起的。GydF4y2Ba
  • 艾滋病患者的抗原滴度可能超過100,000。GydF4y2Ba
  • 它需要許多稀釋液才能達到終點。GydF4y2Ba
  • 寄生蟲和病毒也參與腦膜炎GydF4y2Ba

    應維持自由活動的變形蟲和病毒劑的培養條件,以檢測病毒和寄生蟲。GydF4y2Ba

3.分子方法:GydF4y2Ba

  • PCR(聚合酶鏈反應)GydF4y2Ba
  • 實時PCRGydF4y2Ba

4.其他測試GydF4y2Ba

  • 利盧斯裂解物測試GydF4y2Ba
  • CSF乳酸確定,GydF4y2Ba
  • C反應蛋白GydF4y2Ba
  • 質譜GydF4y2Ba
  • 氣液色譜法GydF4y2Ba

5.文化:GydF4y2Ba

  • 常規細菌學介質:巧克力瓊脂板,5%綿羊血瓊脂板和富集湯,通常沒有指示。GydF4y2Ba
  • 血瓊脂板有助於識別GydF4y2Ba肺炎。GydF4y2Ba
  • 為了隔離GydF4y2Ba流感GydF4y2Ba和GydF4y2Ban. -Meningitidis,aGydF4y2Ba使用巧克力瓊脂板。GydF4y2Ba
  • 板應在37°C下以5%至10%二氧化碳(CO2)孵育至少72小時。GydF4y2Ba
  • 如果沒有CO2孵化器,則可以使用蠟燭罐。GydF4y2Ba
  • 湯應在37°C的空氣中孵育至少5-10天。GydF4y2Ba
  • 當革蘭氏染色顯示形態上類似於厭氧細菌時,也可以接種厭氧血瓊脂板。GydF4y2Ba
  • 如果懷疑腦膿腫,則還使用厭氧血瓊脂板。GydF4y2Ba
  • 對於CSF真菌培養物,應接種兩滴良好的沉積物:GydF4y2Ba
  • Sabouraud Dextrose瓊脂GydF4y2Ba
  • 其他含有培養基的非血液GydF4y2Ba
  • 大腦心髒輸注5%的綿羊血。GydF4y2Ba
  • 真菌培養基的孵育應在30°C下進行4周進行。GydF4y2Ba
  • 如果可能的話,應接種兩組介質。GydF4y2Ba
  • 一組應在30°C下孵育,另一組在35°C下孵育。GydF4y2Ba

樣品:GydF4y2Ba腦膿腫/活檢樣品GydF4y2Ba

大腦和活檢的收集,運輸和處理GydF4y2Ba

  • 在厭氧條件下,應提交活檢標本或腦膿腫的抽吸物。GydF4y2Ba
  • 設備也可用於運輸。GydF4y2Ba
  • 拭子不被視為最佳標本。GydF4y2Ba
  • 如果使用拭子收集膿腫材料,則應在運輸過程中將其保持在厭氧環境中。GydF4y2Ba
  • 在鋪板和塗片製備之前,應在無菌鹽水中勻漿活檢標本。GydF4y2Ba
  • 應將加工保持在最低限度以減少氧合。GydF4y2Ba
  • 接種應在5%的綿羊血和巧克力瓊脂板上進行,以進行膿腫和活檢標本。GydF4y2Ba
  • 在35°C的72小時內,應在5%至10%的CO2中進行孵育。GydF4y2Ba
  • 此外,應在35°C的厭氧環境中接種維生素K和Hemin的厭氧瓊脂板和肉湯,維生素K和Hemin應接種並孵育。GydF4y2Ba
  • 厭氧培養板的孵育至少72小時。GydF4y2Ba
  • 孵育48小時後檢查。GydF4y2Ba
  • 厭氧湯應至少孵育5天。GydF4y2Ba
  • 當懷疑真菌時,應接種真菌培養基,例如血液和抗生素或抑製性黴菌瓊脂。GydF4y2Ba