染色體繃帶和繪畫




染色體帶技術:

  • 通過用某些染料染色分割細胞並在顯微鏡下檢查它們來研究染色體數量和結構,以進行細胞遺傳學分析稱為染色體帶。
  • 大多數細胞學分析在分開細胞上進行(有絲分裂的中期)。因此,使用植物的根或芽尖的共同細胞和動物的胚胎細胞。然而,細胞培養技術的發展已經使得可以在其他類型的細胞中研究染色體。例如,人白細胞可以從外周血中收集,與非分割紅細胞分離,並投入培養物。然後刺激白細胞以通過化學處理除去,並且通過分割細胞樣品進行細胞的中途進行細胞學分析。
  • 用化學物質處理紡織纖維形成時的分隔細胞在治療時,這種顯著的阻滯細胞浸入導致細胞占用水中的低滲溶液中。在製備微觀檢查的情況下,這種細胞在微觀載玻片上擠壓,使得染色體以整潔的方式散布,這可以通過染色觀察
  • 諸如Feulgen的試劑或丙酮果汁的汙漬均勻地汙染染色體,使其難以區分一種染色體形式。現在,細胞發生器使用染色劑沿其長度差異染色染色體。
  • 染色體的染色被稱為帶狀技術,因為汙漬沿染色體的長度產生帶的模式。

染色體帶技術的類型:

1. Q-束縛:

  • Q配帶使用喹吖啶染色(喹吖啶二羥基氯化物或喹吖啶芥末),它是最簡單和第一染色體帶狀方法。喹吖啶染色的染色體在較暗的背景上顯示出明亮的樂隊的特征樣式。因為喹吖啶是DNA插入劑和熒光化合物,隻有當染色體暴露於紫外(UV)光時才出現帶。
  • 紫外線導致喹吖啶分子照耀,因此染色體的部分與喹吖啶亮相亮起,而其他部件仍然是黑暗的。
  • 這種明亮暗的條帶圖案是高度可重複的,並且還針對每種染色體特異性。因此,用喹吖啶條帶用於鑒定細胞中的特定染色體,還可以確定染色體是否在結構上異常。
  • 喹吖啶是嵌入劑,它在DNA螺旋的基礎對之間嵌入。喹吖啶對含有序列的DNA序列具有更多親和力。因此,喹吖啶的熒光沿富序列增強,比GC富含序列顯得明亮。
  • *喹吖啶是致癌物質。

2. G-BANDING:

  • G型是細胞遺傳學中染色體染色的最常用的使用技術。
  • Giemsa染色是一種出色的非熒光染色技術。
  • Giemsa還在每條染色體上產生可重複的帶狀帶。尚不清楚為什麼染色體在用喹吖啶或Giemsa染色時顯示帶
  • 明亮的場顯微鏡用於可視化
  • 在G帶化技術中,在使用Giemsa染色之前,總存在預處理步驟。
  • 通常蛋白水解酶胰蛋白酶用於預處理。因此,該方法也稱為GTG條帶(胰蛋白酶與Giemsa的G型)。
  • Giemsa汙漬有替代方案,它是賴特汙漬。
  • G-帶也產生與染色體長度的Q係數相同的條帶圖案。Geimsa染色對富含含量的DNA序列具有更多的親和力,因此染色黑暗,同時富含GC含量染色光。

3. C-綁定:

  • C-帶稱為焦化異鉻胺染色
  • 在該技術中,在使用Giemsa染色之前,用堿預處理細胞。本技術也稱為CBG染色(B型堿基與Giemsa)被稱為CBG染色。
  • 含有高度重複的DNA序列(衛星DNA)的Y染色體的濃縮鉻醇和遠端部分用於通過C結合技術染色。
  • 染色後,通過明亮場顯微鏡觀察帶。

4. R-綁定:

  • R-帶稱為反向染色體帶。
  • 利用這種帶狀技術,染色體中產生的帶狀圖案被逆轉到G型帶和Q杆生產的帶。IE。在G發帶技術中觀察到的暗帶(在富區域)看起來是R-帶中的光,反之亦然。
  • R-帶狀技術還使用Giemsa染色,但在用Giemsa染色之前,將滑塊在88℃下在緩衝溶液中加熱。加熱導致DNA的變性。
  • 在富裕區域的染色體的變性以更快的速率發生,導致這些區域的DNA喪失,但不是來自富含GC的區域。然後通過染色(R波段)的Giemsa染色來染色GC富裕區域
  • G-帶通常優於R-帶。然而,R-帶可用於染色體鑒定。
  • 在某些情況下,R-帶是G型粘結的有用補充,因為當通過R-帶染色時,可以更容易地檢測到一些小光G帶。
  • R-帶也可用於可視化染色體末端的端粒序列。端粒染色,用r型帶染色,而g型粘結。

染色體繪畫:

  • 這是最先進的技術。利用這種技術,通過用熒光標記的DNA片段治療已經分離和特征的染色體分布來產生彩色染色體圖像。
  • 首先,從所需基因中分離的DNA片段用熒光染料標記,並施加到載玻片上的染色體塗抹。熒光標記的DNA片段將與序列互補的染色體DNA結合。這種結合在互補序列位置處的視覺顏色。

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